Baixe Maturidade sexual e outras Notas de estudo em PDF para Engenharia Biológica, somente na Docsity! “| PE À BIBLIOTECA ! G. Barnabé et R. Billard Ed., L'Aquaculimre du Bar et des Sparidés, INRA Publ, Paris, 1984, 45-52, 5 ' as Ny Techniques d'identification du sexe et d'estimation de la maturité sexuelle chez les poissons vivants PY. LE BAIL et A. FOSTIER INRA, Laboratoire de Physiologie des Poissons, Campus de Beaulieu, F 35042 Rennes Cedex Résumé La simple observation morphologique (caractêres sexuels secondaires) n'est pas toujours suffisante pour reconnaitre le sexe des poissons et estimer leur état de maturité sexuelle, informa- tons utiles à la bonne gestion des élevages. Par contre, une analyse biométrique fine peut parfois mettre en évidence un dimorphisme sexuel. La mesure des niveaux circulants des hormones Sexuelles non seulement permettra d'identifier le sexe (1 I-cétotestostérone, par exemple) mais également d'estimer Pétat de maturité des géniteurs (cestradiol-17f chez la femelte, par exemple). Enfim, au cours de la vitellogenêse, des méthodes de mise en ceuvre rapide et simple sont utilisões pour détecter la présence de la vitellogénine, protéine circulante propre à la femelle. Ces diffé- rentes techniques sont rapidement exposées. La reconnaissance précoce des sexes chez le poisson doit aider à la bonne gestion des élevages. Pour le cheptel de géniteurs, cette information permet d'éva- luer la production d'eufs à venir et donne la possibilité de fixer à volonté le nom- bre d'animaux de chaque sexe et ainsi, par exemple, de réduire la charge due à Vélevage des máles si Pon utilise les techniques de dilution ou, dans Pavenir, de congélation du sperme (Billard, 1984, ce volume). D'autre part, des élevages mono- sexes peuvent bénéficier, lors du grossissement, de Pexistence de meilleurs taux de croissance (Guerrero II, 1982; Hunt er al., 1982) ou de phénomênes de résistance aux maladies (Pickering et Christie, 1580) particuliers à un sexe, Or, "identification des sexes phénotypiques sur des poissons vivants n'est pas toujours aisée chez des espêces à dimorphisme sexuel discret, en particulier lorsqu'il s'agit de juvéniles ou d'adultes en période de repos sexuel (Barnabé, 19764). La méthode actuellement la plus utilisée consiste à attendre la premiêre période de ponte et à identifier les gamêtes émis (Barnabé, 1976b). Lorsque Povulation spontanée ne se fait pas, cette méthode permet de ne reconnaitre avec certitude que les mâles fluants. Par ailleurs, elle ne donne pas de diagnostic définitif pour les hermaphrodites comme la dau- 4 46 P-Y. LE BAIL, A. FOSTIER rade (Zohar et al., 1984, ce volume), pour lesquels il peut être important de suivre les taux d'inversion dans VPélevage. Outre Pidentification du sexe, Festimation de Pétat de maturité est nécessaire pour évaluer le nombre des futurs géniteurs disponibles pour la saison de repro- duction à venir. A la fin du cycle sexuel, elle permet également de déterminer le moment oú doit se faire Vinduction de ponte. Dans ce dernier cas, les biopsies ovariennes, à Vaide d'un cathéter, donnent la possibilité d'une observation directe des ovocytes (Barnabé, 1976b; Gordin et Zohar, 1978). Critêres utilisables pour [identification du sexe et Vestimation de la maturité sexuelle L'identification du sexe est, en général, d'autant plus difficile que Pon se situe, dans le temps, loin de la période de premiêre reproduction (fig. 1). Les critêres d'identification reposent, en premier lieu, sur le déterminisme génétique du sexe, puis sur sa premiêre expression : la différenciation de la gonade. Ensuite, lorsque la gonade différenciée devient peu à peu fonctionnelle, différentes hormones s'avêrent accessibles à Fanalyse. Enfin, lorsque le cycle sexuel de Padulte est en place, de nouvelles caractéristiques sont exploitables, jusqu'ã Vapparition des caractêres sexuels secondaires marqués, puis "émission de gamêtes reconnaissables sans diffi- culté. A côté de ces processus directement liés à la fonction de reproduction peu- vent être utilisées, dans certains cas, des particularités liées à d'autres fonctions. Nous nous proposons de passer briêvement en revue ces différents critêres. Parmi ceux-là, certains sont quantifiables et corrélés au développement des gamêtes, per- mettant une estimation de Vétat de maturité sexuelle. 1. Caryotype Lorsqu'ils sont clairement différenciés (existence d'un hétérochromosome Y ou W), les caryotypes des animaux gonochoriques offrent un moyen primordial de reconnaitre les sexes. Il s'agit cependant de cas peu fréquents (Gold et al., 1979) et les techniques restent longues à mettre en ecuvre. 2. Antigêne H-Y L'un des premiers facteurs impliqués dans la différenciation phénotypique des gonades, chez les vertébrés, est Pantigêne d'histocompatibilité spécifique du mãle chez les mammifêres: Pantigêne H-Y (Haseltine et Ohno, 1981). En utilisant des tests sérologiques mis au point chez les mammifêres, la recherche d'un antigêne H-Y a été faite chez les poissons. Les résultats sont encore trop confus pour envi- sager sa détection comme moyen d'identifier le sexe hétérogamétique (Zaborski, 1982). 3. Stéroides sexuels La possibilité, au moment de la différenciation chez les poissons, d'inverser le sexe à Vaide d'hormones sexuelles exogênes a conduit Yamamoto (1969) à pro- TECHNIQUES D'IDENTIFICATION DU SE: 49 rares techniques permettant identification du sexe chez les juvéniles (Le Bail er al, 1983). Chez le bar, une étude réalisée en 1977 (Fostier ; contrat CNEXO nº 77/1619) nous a montré que les taux 'androgênes totaux les plus élevés se trouvaient chez tes máles, en étant positivement corrélés aux rapports gonadosomatiques (fig. 2; coefficiemt de corrélation = 0,89). Les taux les plus élevés d'estradiol-178 ont été mesurés chez les femelles en vitellogenêse. Par contre, les immatures des deux sexes ne présentent que des niveaux faibles pour les deux hormones. Si Veestradiol per- met de reconnaitre les femelles en vitellogenêse, il serait sans doute préférable de mesurer les taux de Il-cétotestostérone, à la place de Pensemble des androgênes (anticorps peu spécifique) afin d'identifier les máles. La [l-cétotestostérone est effectivement synthétisée par le testicule de bar (Colombo er aí., 1978). Cependant, chez la daurade, testicule et ovaire sont également capables de produire cet andro- gêne (Eckstein er al, 1978). ANDROGENES noj E º 15. .. º 10. 5 . co 1 2 3 É 5 ROs% Figure 2. — Relations entre les androgênes circulants et les rapports gonadosomatiques chez le mále du bar, Dicentrarchus labrax. 3. La détection de la vitellogénine Baste sur une technique d'immunoagglutination, il s'agit sans doute de la méthode la plus performante pour la reconnaissance des sexes (Le Bail et Breton, 1981; Le Bail et al, 1981). La possibilité d'obtenir des antiséra efficaces, qu'ils soient dirigés contre la vitellogénine purifiée à partir de plasma ou contre la lipovi- telline isolée à partir d'ovules (Hara et Hirai, 1978), laisse envisager une extension, sans difficultés majeures, à de nombreuses espêces, d'une méthode mise au point chez les salmonidés. so P-Y. LE BAIL, A. FOSTIER Perspectives NH existe aujourd'hui plusieurs méthodes d'identification du sexe dont le choix est fonction de Váge des animaux analysés et des disponibilités techniques (Maisse, 1983). Le travail réalisé dans les laboratoires de recherche a permis de préciser les critêres utilisables et de mettre en place des techniques d'analyse. Dans certains cas, ces techniques ont été considérablement simplifiées pour en faire des outils de ter- rain. C'est dans cette direction qu'il faut poursuivre les investigations. Summar, Techniques for identifying sex and for estimating the stage of maturity of live fish. Although the good management of cultures requires early knowledge of the sex of future brood fish and the possibility of estimating their stage of sexual maturation, a simple observation of morphology (secondary sex characteristics) is not always enough to obtain this information. More or less complicated techniques are used to resolve these problems. Biopsy can only be done at rather advanced stages of gametogenesis. Fine biometric analysis may sometimes show sexual dimorphism. The measurement of circulating levels of sex hormones (e.g. 1- Ketotestosterone) not only permits sex identification but also the estimation of brood fish matu- rity (e.g. estradiol-178 in the female). A circulating protein specific to one sex has been identified in some species; during vitellogenesis, some rapid, simple methods can be used to detect vitello- genin, the circulating protein found only in females. The present paper discusses briefly these various techniques. Resumen: Técnicas para identificar el sexo y el estado de madurez en peces vivos. Para que la cria tenga éxito, se necesita conocer precozmente tanto el estado de madurez sexual como el sexo de los futuros reproductores y la simple observación de la morfologia (caracteres sexuales secundarios), no siempre es suficiente para darnos tal información. Existen técnicas más o menos complejas que resuelven estas cuestiones. Las biopsias solo se pueden realizar en estados avanzados de gametogenesis. Un análisis biométrico fino pone a veces en evidencia la existencia de dimorfismo sexual. La medida de los niveles hormonales circulantes, no solamente permitiria identificar el sexo (1 I-quetotesterona por ejemplo) sino tambien estimar el estado de madurez de los reproductores (17f-estradiol en la hembra por ejemplo). En ciertas especies se puede determinar una proteina circulante que es especifica del sexo. Existen métodos rápidos y simples que permiten detectar vitelogenina ; proteina circulante que se presenta sola- mente en la hembra. Se discuten de manera rapida las mencionadas técnicas. Riassunto: Tecniche per Videntificazione del sesso e la stima dello stato di maturitã in pesci vivi. Per un'ottima gestione degli allevamenti É necessario conoscere precocemente il sesso e lo stato di maturazione sessuale dei futuri genitori, ma la sola osservazione della morfologia degli animali (caratteri sessuali secondari) non é sempre suficiente per fornire tali informazioni Esistono delle tecniche piá o meno complesse per risolvere questo problema. Le biopsie non possono essere realizzate se non negli stadi abbastanza avanzati della game- togenesi. Un'analisi biometrica accurata puô qualche volta mettere in evidenza un dimorfismo sessuale. La determinazione dei livelli plasmatici e degli ormoni sessuali circolanti non solo per- metterebbe d'identificare il sesso (Il I-chetosterone presente) ma permetterebbe anche di stimare lo stato di maturitã dei genitori (presenza di 17f-estradiolo nelle femmine). In alcune specie puô DO E e TECHNIQUES D'IDENTIFICATION DU S essere messa in evidenza una proteina circolante che ne determina il sesso. Infine, nel corso delia vitellogenesi, alcuni metodi semplici e rapidi permettono di determi- nare il contenuto di vitellogenina, che é una proteina circolante e presente soltanto negli indivi- qui di sesso femminile. Vengono discusse le differenti tecniche di indagine. Références bibliographiques Aviation RR, Prusisiy Yo, Rotina S., 1976, Determination of allogencic and xenogeneic markers in the genus of Tilapia: 1. Identification of sex and hybrids in Tilapia by elec- trophoretic analysis of serum proteins. Bamidgeh, 27, 8-13. Barnasé G., 19764. Contribution à la comaissance de la biologie du loup Dicemtrarchus labrax £. (poison Serranidae). Thêse de Doctorat d'État, Université des Sciences et Techniques du Languedoc, Mompellier, 426 p. Barsant G., 1976b. Rapport technique sur la ponte induite et Vélevage des larves du loup Dicenirarchus labras L. et de la daurade Sparus aurata L. Études et Revues F.A.O. nº 55, 63-16. Briaao R., 1984. 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